تطوير وتقييم ميداني لطريقة كشف سريعة لـ Babesia microti باستخدام تقنية التضخيم البوليميرازي بإعادة التركيب المفلورة (RPA)

لماذا يهم وجود طفيلي مخفي ينقله القراد

يعتبر كثير من الناس لسعات القراد مجرد إزعاج، لكن بعض القراد يحمل Babesia microti، طفيلي مجهري يغزو خلايا الدم الحمراء بهدوء. في الأشخاص الأصحّاء قد يسبب أعراضًا شبيهة بالإنفلونزا؛ أما لدى المرضى المعرضين للخطر، وخصوصًا مستقبلو نقل الدم، فيمكن أن يكون مهددًا للحياة. من الصعب كشف هذا الطفيلي مبكرًا لأنه غالبًا ما يتواجد بمستويات منخفضة جدًا في الدم. تصف هذه الدراسة اختبارًا سريعًا جديدًا يهدف إلى اكتشاف B. microti بسرعة ودقة وحتى خارج المختبرات المتقدمة، مما يساعد على حماية المرضى وإمداد الدم.

عدوى خفية في الدم

داء البابيزي، المرض الناجم عن طفيليات Babesia، يمثل مصدر قلق متزايد في عدة مناطق من العالم، بما في ذلك الصين والولايات المتحدة. تنقل القرادات الطفيلي من الحيوانات البرية والمستأنسة إلى البشر، حيث يخفي نفسه داخل خلايا الدم الحمراء. يمكن أن تُشَبَه الأعراض المبكرة، مثل الحمى والتعب وفقر الدم، بالملاريا أو التهابات شائعة أخرى. وبما أن الطفيلي قد يدور بمستويات منخفضة للغاية، فإن ميكروسكوب مسحات الدم القياسي أو حتى بعض الاختبارات الجزيئية كثيرًا ما يفوت العدوى المبكرة أو الخفيفة. وهذا مثير للقلق بشكل خاص لبنوك الدم، لأن المتبرعين الذين يبدون بصحة جيدة قد ينقلون الطفيلي دون علمهم إلى متلقيّات النقل.

طريقة أسرع لرصد الطفيلي

ركز الباحثون على تقنية تسمى التضخيم البوليميرازي بإعادة التركيب (RPA)، التي يمكنها نسخ مقاطع محددة من الحمض النووي عند درجة حرارة ثابتة ومعتدلة. على عكس تفاعل البوليميراز المتسلسل التقليدي (PCR)، الذي يتطلب دورات تسخين وتبريد دقيقة وآلات متخصصة، يمكن تشغيل RPA عند حوالي درجة حرارة الجسم خلال نحو 20 دقيقة، مما يجعلها واعدة للاستخدام في العيادات أو الميدان. صمّم الفريق مواد تفاعلية لـ RPA تستهدف منطقة جينية محفوظة جدًا لدى B. microti تعرف باسم 18S rRNA، مع فحص وتحسين دقيق للبادئات والمجسات لضمان تمييزها لـ B. microti وعدم تداخلها مع كائنات قريبة مثل طفيليات الملاريا.

حساسية ودقة وسرعة الاختبار

بعد بناء الاختبار، طرح العلماء ثلاثة أسئلة رئيسية: ما أدنى كمية من حمض الطفيلي يمكنه كشفها؟ هل يخلط بين B. microti وميكروبات أخرى؟ وكيف يؤدي في عينات دم حقيقية؟ في المختبر، كشف الاختبار الفلوري لـ RPA بشكل موثوق عن كميات تصل إلى 1 فيمتوغرام من حمض نووي B. microti لكل ميكرولتر — ما يعادل تقريبًا عددًا ضئيلًا من الطفيليات في مليلتر واحد من الدم — وعمل بأفضلية عند 39 °م في 20 دقيقة فقط. عند مقارنته بطريقة PCR المتداخلة القياسية، كان الاختبار الجديد أكثر حساسية بنحو عشرة أضعاف للحمض النووي النقي وحوالي 600 مرة أكثر حساسية عند تخفيف دم مصاب من فأر، متمكنًا من العثور على ما يصل إلى 0.046 طفيلي لكل ميكرولتر، وهو ما يقل بكثير عن مدى العديد من الطرق السريرية الحالية.

من الفئران والمرضى إلى العيادات الواقعية

ثم انتقل الفريق إلى ما هو أبعد من الحمض النووي المُنقّى. في نموذج فأري مُسيطر عليه، تابعوا العدوى مع مرور الوقت وقارنوا ثلاث طرق: الميكروسكوب التقليدي، PCR المتداخل، والاختبار الجديد RPA. لم ترصد الميكروسكوبية الطفيلي حتى اليوم الخامس عشر بعد العدوى، ظهر PCR المتداخل إيجابيًا في بعض الحيوانات بحلول اليوم التاسع، أما RPA فكشف العدوى في عدد أكبر من الحيوانات في وقت أبكر، حيث كانت جميع الفئران إيجابية بحلول اليوم الثاني عشر. كما حدد الاختبار بشكل صحيح حالتين بشريتين مؤكّدتَين بالإصابة بداء البابيزي. أخيرًا، طبق الباحثون الاختبار على 119 شخصًا في مقاطعة خنان بالصين ممن عانوا من حمى وانخفاض في عدد الصفائح الدموية، وهي أعراض قد تسببها عدة أمراض منقولة بالقراد. وجد RPA B. microti في 21 مريضًا، بينما وجد PCR المتداخل 20؛ وأظهرت التحليلات الإحصائية اتفاقًا وثيقًا بين الطريقتين، لكن RPA التقط حالة إيجابية إضافية. كشفت الدراسة أيضًا أن العديد من المرضى حملوا كلًا من B. microti وBunyavirus، مما يبرز كيف تعقّد العدوى المشتركة التشخيص.

ماذا يعني هذا للمرضى وسلامة الدم

لغير المتخصصين، الرسالة المركزية واضحة: يقدم هذا الاختبار الفلوري RPA وسيلة سريعة، متنقلة، وحساسة جدًا لاكتشاف طفيلي ينقله القراد في الدم. من خلال اكتشاف B. microti عند مستويات طفيليات أدنى بكثير مما تستطيع الميكروسكوبات والعديد من الاختبارات القياسية رؤيته، قد يساعد على تشخيص المرضى مبكرًا، وتوجيه العلاج المناسب بدلًا من الخلط بين داء البابيزي والملاريا، وتعزيز فحوصات درع الدم في المناطق التي يهدد فيها هذا الطفيلي إمدادات الدم. ومع بقاء تحديات عملية قبل تعميم استخدامها على نطاق واسع، تُظهر الدراسة أن اختبارات DNA البسيطة والمناسبة للميدان يمكن أن تلعب دورًا قويًا في الدفاع عن الصحة العامة ضد الأمراض الناشئة المنقولة بالقراد.

الاستشهاد: Cai, Y., Yang, H.Y., Qiang, K. et al. Development and field evaluation of a rapid detection method for Babesia microti using fluorescent recombinase polymerase amplification(RPA) technology. Sci Rep 16, 14188 (2026). https://doi.org/10.1038/s41598-026-42288-3

الكلمات المفتاحية: داء البابيزي, أمراض منقولة بالقراد, سلامة نقل الدم, اختبار DNA سريع, Babesia microti