Valutazione dell'acido lattico come nuovo fissativo per applicazioni istologiche e neuroanatomiche

Perché la conservazione dei tessuti più sicura è importante

Ogni volta che medici o scienziati studiano i tessuti al microscopio, devono prima «fissarli» in modo che le cellule non si degradino. Il composto tradizionale per questo scopo, la formaldeide, preserva molto bene la struttura ma è tossico e associato a rischi oncologici per chi lo manipola quotidianamente. Questo studio pone una domanda semplice ma importante: l'acido lattico, un comune conservante alimentare, potrebbe offrire un metodo più sicuro per preparare campioni cerebrali pur mantenendo i dettagli fini di cui patologi e ricercatori si affidano?

Da conservante alimentare a strumento di laboratorio

L'acido lattico è ampiamente usato per mantenere alimenti, cosmetici e prodotti per la casa privi di microrganismi dannosi. È considerato sicuro per i consumatori e ha noti effetti antibatterici e conservanti sui tessuti. Per questo motivo i ricercatori hanno esplorato se soluzioni di acido lattico potessero anche stabilizzare il tessuto cerebrale per le colorazioni microscopiche standard, concentrandosi sui cervelli di topo come modello. Hanno confrontato diverse concentrazioni di acido lattico con l'attuale fissativo standard, la formalina tamponata neutra, e con una soluzione salina che funge da controllo non fissativo.

Mettere l'acido lattico alla prova

Il gruppo ha utilizzato due metodi comuni di fissazione del tessuto cerebrale. Nella fissazione per immersione, il cervello asportato viene posto direttamente nella soluzione. Nella fissazione per perfusione, la soluzione viene pompata attraverso i vasi sanguigni dell'animale prima che il cervello venga rimosso, il che di solito garantisce una conservazione più uniforme. I ricercatori hanno testato l'acido lattico a diverse concentrazioni e per vari tempi, quindi hanno processato i campioni nel modo abituale: inclusione in paraffina, taglio di sezioni molto sottili e colorazione con gli standard ematossilina ed eosina usati nella maggior parte dei laboratori di patologia.

Quanto bene è stata preservata la struttura cerebrale

Al microscopio, i cervelli fissati in formalina mostravano i tessuti più puliti e continui, con solo minime fessurazioni, contorni cellulari chiari e strati di materia grigia e bianca ben conservati. I campioni trattati con acido lattico apparivano complessivamente peggiori, specialmente a basse concentrazioni, dove il tessuto mostrava più rotture, fibre nervose meno compatte e dettagli cellulari sfumati. Soluzioni più concentrate di acido lattico miglioravano sensibilmente i risultati: le concentrazioni più alte riducevano le fessurazioni e mantenevano le forme cellulari ragionevolmente intatte, sebbene la materia bianca, ricca di lipidi, restasse più fragile rispetto ai campioni fissati con formalina. Quando l'acidità dell'acido lattico veniva neutralizzata, le prestazioni calavano nettamente, suggerendo che la sua capacità di preservare i tessuti dipende in parte dal rimanere acida.

La perfusione migliora le prestazioni dell'acido lattico

Quando i ricercatori sono passati dalla semplice immersione alla perfusione attraverso i vasi sanguigni, le prestazioni dell'acido lattico sono migliorate. L'acido lattico ad alta concentrazione somministrato per perfusione ha prodotto fette cerebrali con molte meno fessurazioni e dettagli cellulari più nitidi rispetto a campioni trattati solo con soluzione salina e, sotto certi aspetti, si è avvicinato alla formalina. Tuttavia, la formalina ha continuato a fornire la materia bianca più stabile e le caratteristiche nucleari più nitide. I pattern osservati indicano una differenza chiave nel modo in cui agiscono i due chimici: la formalina crea forti legami incrociati tra le proteine, mentre l'acido lattico denatura e coagula principalmente le proteine senza formare la stessa rete resistente, rendendo le aree ricche di lipidi più vulnerabili durante le fasi di lavorazione successive.

Cosa significa per le pratiche future

Questo studio mostra che l'acido lattico non può sostituire completamente la formalina per il tessuto cerebrale, in particolare quando è necessario preservare strutture estremamente delicate. Tuttavia, l'acido lattico concentrato, specialmente se somministrato per perfusione, può mantenere gran parte dell'architettura cerebrale di base e lo fa con una sostanza chimica molto meno pericolosa da maneggiare. In alcune situazioni di ricerca o didattiche in cui evitare la formaldeide è una priorità e una perdita di dettagli fini è accettabile, la fissazione a base di acido lattico potrebbe offrire un compromesso utile tra sicurezza e qualità del tessuto.

Citazione: Venuto, M.T., Soldat-Böttcher, Z., Kleine, J. et al. Evaluation of lactic acid as a novel fixative for histological and neuroanatomical applications. Sci Rep 16, 15746 (2026). https://doi.org/10.1038/s41598-026-51513-y

Parole chiave: fissazione con acido lattico, alternativa alla formalina, istologia del cervello di topo, conservazione dei tessuti, neuroanatomia