Bir Box–Behnken tasarımı destekli RP-HPLC yöntemi geliştirme ve dört antiviral ilacın farmasötik dozaj formlarında eş zamanlı tayini için optimizasyon

İlaçların kontrol edilmesinin önemi

Yeni hastalıklar ortaya çıktığında hekimler sıklıkla yıllarca sürebilecek yeni ilaç geliştirme sürecini beklemek yerine mevcut antiviral ilaçlara yönelir. Ancak bu yeniden kullanım amaçlı ilaçlar hastalara ulaşmadan önce, laboratuvarlar her bir tabletin ve flakonun gerçekten doğru miktarda etken madde içerdiğini doğrulamak zorundadır. Bu makale, bilim insanlarının COVID-19 çevresinde kullanılan dört önemli antivirali tek bir çalışmada ölçebilen hızlı, güvenilir ve daha sürdürülebilir bir laboratuvar testi nasıl yarattıklarını anlatıyor.

Bir testte dört virüs savaşçısı

Çalışma favipiravir, sofosbuvir, ledipasvir ve remdesivir olmak üzere dört antiviral ilaca odaklanıyor. Bu ilaçların her biri, COVID-19’a neden olan koronavirüsün de kullandığı RNA’ya dayanan virüsleri hedef alır. Hepatit C ve influenza gibi diğer enfeksiyonlar için zaten onaylı olmaları nedeniyle pandemi sırasında yeniden kullanım için güçlü adaylar haline geldiler. Ancak kalite kontrol laboratuvarları genellikle her ilacı ayrı ayrı test eder; bu da zaman, çözücü ve iş gücü maliyeti doğurur. Araştırmacılar, gerçek farmasötik ürünlerde aynı anda tüm dördünü doğru şekilde ölçebilen tek bir laboratuvar yöntemi tasarlamayı amaçladılar.

Laboratuvar taraması nasıl çalışıyor

Ekip, yüksek performanslı sıvı kromatografisi (HPLC) olarak bilinen yaygın bir ayırma tekniğini kullandı; bu, bir kolondaki sofistike bir filtreleme olarak düşünülebilir. Çözünen ilaçları taşıyan bir sıvı dolu tüp boyunca akar ve her bileşik, dolgunun ve akışkanın ne kadar güçlü bağlandığına bağlı olarak farklı hızlarda hareket eder. Bir detektör daha sonra her ilacın kolonu terk ettiği zamanı bir grafik üzerinde ayrı bir pik olarak kaydeder. Bilim insanları yöntemi hastane ve fabrika laboratuvarları için pratik tutmak adına standart bir kolon tipi ve su bazlı tampon ile yaygın bir organik çözücü olan asetonitrilin basit bir karışımını seçtiler.

Koşulların akıllı ayarlanması

Deneysel olarak tek tek bir ayarı değiştirmek yerine, araştırmacılar Box–Behnken tasarımı olarak bilinen istatistiksel planlama aracını, daha geniş bir “tasarım ile kalite” felsefesinin parçası olarak kullandılar. Ayrışmanın kalitesini ve çalışma süresini kontrol eden üç temel düğüme odaklandılar: tamponun asitliği, asetonitril oranı ve sıvının akış hızı. Sadece on beş dikkatle seçilmiş deney yaparak, bu düğümlerin her bir ilaç çifti arasındaki ayrışmanın keskinliğini ve toplam analiz süresini nasıl etkilediğini tanımlayan matematiksel denklemler kurdular. Bu denklemlerin bilgisayar çizimleri, dört pikin tümünü net şekilde ayrı tutarken çalışmayı makul düzeyde kısa tutan koşulları belirlemelerine yardımcı oldu.

Güvenilirlik ve emniyeti kanıtlama

En iyi koşulları seçtikten sonra ekip yöntemin gerçek hayatta gereken performansı gösterdiğini kapsamlı biçimde kontrol etti. Detektör sinyalinin ilaç konsantrasyonu arttıkça işe yarar aralıklarda doğrusal olarak arttığını, ölçülen değerlerin gerçek değerlere çok yakın olduğunu ve yinelenen çalışmalarda hemen hemen aynı sonuçların elde edildiğini gösterdiler. Yöntem ilaçların düşük seviyelerini tespit edebildi ve ticari tabletler ile enjeksiyonluk formlardaki diğer bileşenlerden ayırt edebildi. Performansın ötesinde, yazarlar çevresel ve pratik açıdan yöntemin dostluğunu modern puanlama araçlarıyla değerlendirerek “yeşillik”, uygulanabilirlik ve genel kaliteyi incelediler; puanlar doğruluk, kaynak kullanımı ve günlük kullanılabilirlik arasında iyi bir denge olduğunu gösterdi.

Halk sağlığı için anlamı

Özetle makale, tek iyi ayarlanmış bir HPLC düzeneğinin farmasötik ürünlerdeki dört önemli antiviral ilacı aynı anda güvenilir şekilde ölçebileceğini gösteriyor. Kalite kontrol laboratuvarları için bu, daha az ayrı test, daha az çözücü tüketimi ve parti ilaçların daha hızlı denetimi anlamına gelir. Pandemi hazırlığı bağlamında ise bu tür sadeleştirilmiş yöntemler, yeniden kullanım amaçlı antivirallerin arzını izlemeyi ve standart dışı veya sahte ürünlere karşı korunmayı kolaylaştırarak hızlı müdahale gerektiğinde daha güvenli ve verimli tedavi seçeneklerini destekler.

Atıf: Ghazy, F.H., El-Bagary, R.I., Fahim, S.H. et al. A Box–Behnken design–assisted RP-HPLC method development and optimization for simultaneous determination of four antiviral drugs in pharmaceutical dosage forms. Sci Rep 16, 14733 (2026). https://doi.org/10.1038/s41598-026-50549-4

Anahtar kelimeler: antiviral ilaçlar, HPLC, ilaç kalite kontrolü, COVID-19, yöntem geliştirme