低亲和力的抗B7-H3克隆MJ18对小鼠B7-H3的结合无法诱导肿瘤退缩

这对癌症研究的重要性

癌症免疫疗法常依赖抗体——实验室合成的蛋白质，旨在结合肿瘤细胞并协助免疫系统将其清除。一个有前景的靶点是名为B7-H3的分子，它在许多人类癌症中高度表达而在健康组织中稀少。本文对一种广泛使用的研究抗体MJ18进行了严格审视，该抗体据称在小鼠研究中可阻断B7-H3。作者发现MJ18几乎不与其预期靶点结合，也无法减缓肿瘤生长，这对以往使用该工具的动物实验解释提出了质疑。

肿瘤细胞上的潜在“癌症旗帜”

B7-H3备受关注，因为它表现得像一个分子屏障：富含该蛋白的肿瘤内部通常具有较少的侵袭性免疫细胞，并且与更差的病人预后相关。在若干小鼠模型中，从肿瘤细胞中敲除B7-H3基因会释放更强的免疫攻击，能够导致肿瘤缩小或消失。这些观察推动了针对人类癌症中B7-H3的药物、工程化免疫细胞和抗体-药物偶联物的开发。然而，B7-H3抑制免疫的具体机制——甚至它在免疫细胞上与哪个受体相互作用——仍不确定，尤其是小鼠与人类B7-H3在结构上存在差异。

常用工具接受检验

为了在活体小鼠中研究B7-H3，许多团队依赖一种来自大鼠的单一抗体MJ18，据报道可识别小鼠B7-H3并阻断其免疫抑制活性。早期使用MJ18的多项疾病模型研究（包括癌症）常报告肿瘤生长变慢和生存改善。当前团队最初在横纹肌肉瘤的小鼠模型中测试MJ18——一种儿童软组织癌，先前已将B7-H3标注为重要的免疫逃逸机制。当MJ18未能改善肿瘤控制时，研究者将测试扩展到另外两种B7-H3阳性的肿瘤类型——胰腺癌和乳腺癌，这两者对B7-H3基因敲除明确敏感。在所有三个模型中，敲除肿瘤细胞中的B7-H3均显著延缓或消除肿瘤，但以文献中类似剂量和给药方案用MJ18处理小鼠对肿瘤生长或生存并无可检测的影响。

检验MJ18是否真正命中靶点

作者随后提出一个令人惊讶地尚未严格回答的基本问题：MJ18是否确实结合小鼠B7-H3，以及结合力有多强？他们使用流式细胞术，将MJ18与另一种已知能检测B7-H3的抗体EPNCIR122进行比较。在若干小鼠肿瘤细胞系上，EPNCIR122产生了明显信号，该信号在敲除B7-H3基因后消失，证实了其特异性。相比之下，MJ18即便在高浓度下也未显示令人信服的结合。当他们检查脾脏的免疫细胞时，MJ18确实显示结合，但结合模式与B7-H3不一致，且EPNCIR122在这些细胞上检测不到B7-H3，表明MJ18可能结合了其他分子。

深入挖掘结合伙伴

为了识别MJ18实际可能识别的对象，研究人员用MJ18或EPNCIR122拉下细胞表面蛋白并通过质谱分析，同时过滤掉常见的背景污染物。在肿瘤细胞中，EPNCIR122将B7-H3显著富集于其他蛋白之上，确认了它是一种高度特异性的试剂。然而，MJ18拉下的是一组混合蛋白，其中B7-H3仅微弱出现且水平与非特异性结合者相当。通过表面等离子共振（surface plasmon resonance）——一种量化分子相互作用的灵敏技术——的测量进一步说明了问题：MJ18对小鼠B7-H3的亲和力大约比EPNCIR122低7,000倍——远低于治疗性抗体常见的水平。

当抗体被错误的细胞捕获时

事情并不止于结合弱。在脾细胞中，额外的测试显示MJ18及类似的大鼠抗体会被小鼠的Fc受体识别——这些受体位于免疫细胞上，天然能结合抗体的尾部。阻断这些受体可显著降低MJ18信号，这意味着其表面结合的大部分似乎来自免疫细胞抓住了抗体本身，而非MJ18特异性识别某一细胞表面蛋白。试图在免疫细胞上定位MJ18的独特蛋白伙伴仅得到了与背景噪声无法区分的候选物。总体而言，数据表明MJ18在很大程度上表现为低亲和力、非特异性的抗体，其相互作用主要由Fc受体介导，而非对B7-H3的精确识别。

对未来的意义

对非专业读者来说，关键结论很直接：尽管B7-H3仍然是许多癌症中引人注目的靶点，MJ18抗体并不是可靠的工具。它在小鼠中仅弱结合B7-H3，且不能再现通过敲除B7-H3基因所见的强效肿瘤控制。此前报告MJ18显著益处的早期小鼠研究因此可能反映了其他效应——例如其抗体尾部与免疫细胞受体的相互作用——而非真正阻断B7-H3。作者主张该领域迫切需要对小鼠B7-H3具有高亲和力并经过严格验证的抗体，研究者应常规确认此类工具的特异性和结合强度。只有借助可靠的试剂，动物模型的发现才能被信赖并用于指导下一代针对B7-H3的治疗策略开发以造福患者。

引用: Gulyás, D., Nammor, T., Frizzell, J. et al. Low-affinity binding of anti-B7-H3 clone MJ18 to murine B7-H3 fails to induce tumor regression. Sci Rep 16, 9519 (2026). https://doi.org/10.1038/s41598-026-40628-x

关键词: B7-H3, 癌症免疫疗法, 抗体验证, 免疫检查点, 肿瘤模型