Méthode RP‑HPLC basée sur un DOE écologique pour la détermination simultanée de l’azélastine et du losartan dans des échantillons de plasma humain enrichi

Pourquoi cette recherche est importante

De nombreuses personnes souffrent à la fois de troubles cardiovasculaires, comme l’hypertension, et de maladies allergiques. Deux médicaments souvent prescrits dans ces contextes sont l’azélastine, un anti‑allergique, et le losartan, un antihypertenseur qui protège aussi les vaisseaux sanguins. Les cliniciens et les chercheurs ont besoin de méthodes fiables pour quantifier la présence de ces médicaments dans le sang d’un patient, à la fois pour ajuster le traitement et pour étudier de nouvelles thérapies combinées. Cette étude présente un test de laboratoire très sensible capable de mesurer simultanément les deux médicaments dans le plasma humain, tout en réduisant les déchets chimiques et en rendant le procédé plus respectueux de l’environnement.

Deux médicaments, un problème de santé commun

Une inflammation chronique de faible intensité et des lésions de l’intima des vaisseaux sanguins sont au cœur de nombreuses maladies modernes, notamment le diabète, l’hypertension et les affections allergiques. L’histamine libérée par les cellules immunitaires contribue aux symptômes allergiques et peut aussi favoriser les maladies artérielles. L’azélastine agit en stabilisant ces cellules immunitaires et en bloquant les effets de l’histamine, atténuant ainsi les symptômes allergiques. Le losartan, initialement développé pour abaisser la pression artérielle, réduit la charge sur le cœur et les vaisseaux et atténue également l’inflammation et l’activation plaquettaire. Des études animales suggèrent que l’utilisation conjointe de ces deux médicaments peut améliorer la fonction vasculaire et la glycémie plus que chacun pris isolément, faisant de ce couple une option intéressante pour de futures thérapies combinées.

Le défi du suivi des médicaments dans le sang

Pour tester et utiliser en toute sécurité cette combinaison médicamenteuse chez l’humain, les scientifiques doivent être capables de mesurer des quantités très faibles d’azélastine et de losartan dans des échantillons sanguins. Les méthodes analytiques traditionnelles se concentrent souvent sur un seul médicament, nécessitent de nombreux ajustements par essais‑erreurs et utilisent de grands volumes de solvants organiques coûteux et nocifs pour l’environnement. Les auteurs ont cherché à concevoir un test unique et rationalisé capable de séparer et de quantifier les deux médicaments dans le plasma humain avec une grande précision et exactitude, tout en économisant du temps, du solvant et de l’énergie.

Une approche plus intelligente pour concevoir le test

Plutôt que d’ajuster la méthode par intuition, les chercheurs ont utilisé une stratégie structurée de « design of experiments » (planification expérimentale). Ils ont d’abord exploré de nombreux facteurs expérimentaux possibles — type de solvant, débit, température et acidité de la solution — puis identifié trois facteurs ayant le plus d’impact : le pourcentage de méthanol, le pourcentage d’acétonitrile et l’acidité du tampon aqueux. Ils ont ensuite appliqué un plan expérimental statistique appelé plan composite central pour tester différentes combinaisons de ces trois facteurs en seulement 20 expériences soigneusement choisies. En analysant comment chaque réglage affectait la forme des pics, la séparation entre les deux médicaments, le signal de mesure et le temps d’analyse total, ils ont construit des modèles mathématiques qui ont permis d’identifier les conditions optimales.

Comment le test écologique fonctionne en pratique

Dans les conditions finales, un mélange de méthanol, une faible quantité d’acétonitrile et un tampon phosphate faiblement acide entraînent les médicaments à travers une colonne chromatographique, où ils se séparent dans le temps avant d’atteindre un détecteur fluorescent sensible. Cette configuration produit des signaux nets et bien résolus pour l’azélastine et le losartan en environ 14 minutes. La méthode peut mesurer de manière fiable des concentrations extrêmement basses de chaque médicament dans le plasma humain, ce qui la rend adaptée à la surveillance thérapeutique. La validation a montré une excellente linéarité, exactitude, répétabilité et robustesse, ce qui signifie que de petites variations quotidiennes n’altèrent pas ses performances. Fait important, la conception expérimentale efficace a réduit le nombre d’essais et le volume de solvant nécessaires au développement et à l’exécution de la méthode.

Évaluer les performances en tenant compte de l’environnement

Pour juger de la dimension écologique de leur approche, les auteurs ont appliqué deux outils d’évaluation modernes, Complex MoGAPI et AGREE, qui notent les méthodes analytiques selon des critères tels que la toxicité des solvants, la génération de déchets, la consommation d’énergie et la durabilité globale. La nouvelle méthode a obtenu de meilleurs scores que les approches chromatographiques conventionnelles qui n’utilisent pas de plan expérimental structuré, reflétant sa réduction de l’usage de solvants et du nombre d’optimisations. D’autres outils évaluant le coût, la faisabilité et l’usage quotidien ont indiqué que la méthode est non seulement écologique mais aussi simple et suffisamment abordable pour un usage de routine en laboratoire.

Ce que cela signifie pour les patients et les laboratoires

Concrètement, l’étude fournit un test de laboratoire capable de suivre avec précision deux médicaments importants en cardiologie et en allergologie dans le sang humain en utilisant moins de temps, moins de solvants et moins de ressources. Une telle méthode peut soutenir les études cliniques sur les combinaisons azélastine‑losartan, aider les médecins à surveiller les traitements des patients hospitalisés et encourager une adoption plus large de pratiques analytiques plus vertes. En mariant une planification expérimentale réfléchie et une conscience environnementale, ce travail illustre comment les laboratoires peuvent obtenir de meilleures données tout en réduisant leur empreinte écologique.

Citation: Roshdy, A., Belal, F. & Marie, A.A. Green DOE based RP-HPLC method for the simultaneous determination of Azelastine and Losartan in spiked human plasma samples. Sci Rep 16, 8263 (2026). https://doi.org/10.1038/s41598-026-39426-2

Mots-clés: surveillance thérapeutique des médicaments, azélastine et losartan, chimie analytique verte, analyse du plasma sanguin, chromatographie liquide haute performance