Détermination de l’hydrocortisone et de la cortisone dans la salive artificielle par microextraction en phase liquide par formation de fines gouttelettes assistée par pulvérisation couplée à LC–MS/MS

Pourquoi la salive peut raconter une histoire de stress

Nos organismes libèrent en continu des hormones du stress qui nous aident à nous réveiller le matin, à lutter contre les infections et à faire face aux défis quotidiens. Deux hormones étroitement liées, l’hydrocortisone (souvent appelée cortisol) et la cortisone, assurent une grande partie de ces fonctions. Les médecins souhaitent de plus en plus suivre les deux dans la salive, car son prélèvement est simple et indolore. Cette étude présente une méthode très sensible pour mesurer des quantités infimes de ces deux hormones dans des fluides imitant la salive, ouvrant la voie à des tests de stress futurs plus simples et plus fiables.

Les deux faces d’une hormone du stress

L’hydrocortisone est le signal actif du système de stress, tandis que la cortisone est son partenaire plus discret, formée lorsque l’organisme met temporairement ce signal en veille. Des enzymes dans différents tissus convertissent sans cesse l’une en l’autre, ajustant la tension artérielle, la glycémie, l’immunité et les rythmes jour–nuit. En raison de cet équilibre délicat, les cliniciens ont souvent besoin non seulement du taux de chaque hormone, mais aussi de leur rapport. Les variations de ce duo peuvent aider à diagnostiquer des affections telles que l’insuffisance surrénalienne, la production excessive d’hormones et des troubles héréditaires du métabolisme des hormones, ainsi que les effets secondaires de certains médicaments.

Pourquoi il est si difficile de mesurer ces hormones

Malgré leur importance, l’hydrocortisone et la cortisone sont étonnamment difficiles à mesurer avec précision, surtout dans la salive. Leurs concentrations naturelles dans la salive sont extrêmement faibles — souvent de l’ordre de quelques milliardièmes de gramme par millilitre — et la salive contient des protéines et d’autres substances qui peuvent masquer ou déformer le signal. Les anciens tests sur le sang et les urines manquent soit de précision, soit exigent des étapes de préparation complexes. Même les techniques de laboratoire avancées peinent parfois parce que les deux hormones se ressemblent et se comportent si semblablement qu’elles se chevauchent facilement lors de l’analyse, brouillant le rapport critique entre elles.

Une pulvérisation douce qui suralimente la détection

Les chercheurs ont abordé ce problème en combinant un appareil de mesure puissant, la chromatographie liquide–spectrométrie de masse en tandem, avec une étape astucieuse de préparation d’échantillon appelée microextraction en phase liquide par formation de fines gouttelettes assistée par pulvérisation. En termes simples, ils préparent d’abord une salive artificielle qui imite étroitement la salive réelle, puis ajoutent une petite quantité de solvant organique à l’aide d’un pulvérisateur de type nasal. Ce pulvérisateur transforme le solvant en une brume de minuscules gouttelettes qui se mélangent brièvement à la salive, extrayant les hormones dans une couche liquide séparée. Après une courte centrifugation et une évaporation douce, les hormones concentrées sont redissoutes dans un très petit volume et injectées dans l’appareil de mesure.

Ajustements fins pour la clarté et la sensibilité

Pour rendre ce protocole véritablement fiable, l’équipe a ajusté systématiquement de nombreux paramètres : quel solvant pulvériser, combien d’échantillon utiliser, combien de jets de pulvérisation appliquer, combien de temps mélanger et quelle quantité de solvant employer pour la ré-dissolution finale. Ils ont aussi optimisé les réglages instrumentaux afin que l’hydrocortisone et la cortisone apparaissent comme des pics propres et séparés avec des signaux stables. Dans les meilleures conditions, la nouvelle méthode a pu détecter des niveaux bien en dessous de ceux habituellement trouvés dans la salive — jusqu’à 64 fois plus sensible pour la cortisone et 11 fois pour l’hydrocortisone comparé à une mesure directe sans l’étape de pulvérisation. Des tests sur deux recettes de salive artificielle différentes ont montré que, lorsque l’étalonnage était correctement adapté au fond salivaire, les quantités mesurées concordaient étroitement avec les montants réellement ajoutés.

Ce que cela signifie pour les futurs tests du stress

Concrètement, cette étude livre une méthode de laboratoire finement réglée capable de « percevoir » les signaux à peine audibles des hormones du stress dans des fluides de type salivaire. Bien que le travail actuel ait utilisé de la salive artificielle pour éviter des contraintes éthiques et pratiques, les résultats suggèrent que l’approche pourrait être adaptée à la salive humaine réelle dans de futures études cliniques. Si cela se confirme, une telle méthode pourrait aider les médecins à surveiller les troubles liés au stress, à adapter les thérapies de remplacement hormonal et à étudier comment de nouveaux médicaments affectent l’équilibre hormonal — le tout à partir d’un simple prélèvement de salive.

Citation: Gürsoy, S., Bodur, S., Atakol, A. et al. Determination of hydrocortisone and cortisone in artificial saliva by spray assisted fine droplet formation liquid phase microextraction coupled to LC–MS/MS. Sci Rep 16, 7064 (2026). https://doi.org/10.1038/s41598-026-38457-z

Mots-clés: cortisol salivaire, cortisone, hormones du stress, microextraction, spectrométrie de masse