Determinación de hidrocortisona y cortisona en saliva artificial mediante microextracción en fase líquida por formación de finas gotas asistida por spray acoplada a LC–MS/MS

Por qué la saliva puede contar la historia del estrés

Nuestros cuerpos liberan constantemente hormonas del estrés que nos ayudan a despertarnos por la mañana, combatir infecciones y afrontar los retos cotidianos. Dos hormonas estrechamente relacionadas, la hidrocortisona (habitualmente llamada cortisol) y la cortisona, llevan gran parte de esa carga. Los médicos desean cada vez más seguir ambas en la saliva porque su recogida es sencilla e indolora. Este estudio presenta una forma muy sensible de medir cantidades extremadamente pequeñas de estas dos hormonas en fluidos que imitan la saliva, ofreciendo un avance hacia pruebas de estrés futuras que podrían ser más simples y fiables.

Las dos caras de una hormona del estrés

La hidrocortisona es la señal activa de “arranque” del sistema de estrés, mientras que la cortisona es su compañera más silenciosa, formada cuando el cuerpo apaga temporalmente esa señal. Enzimas en distintos tejidos convierten constantemente una en la otra, afinando la presión arterial, la glucemia, la inmunidad y los ritmos circadianos. Debido a este equilibrio delicado, los médicos a menudo necesitan no solo el nivel de cada hormona, sino también su relación. Cambios en este par pueden ayudar a diagnosticar afecciones como insuficiencia suprarrenal, producción excesiva de hormonas y problemas heredados en el procesamiento hormonal, así como efectos secundarios de ciertos fármacos.

Por qué es tan difícil medir estas hormonas

A pesar de su importancia, la hidrocortisona y la cortisona son sorprendentemente difíciles de medir con precisión, especialmente en la saliva. Sus niveles naturales en la saliva son extremadamente bajos —a menudo apenas unos pocos nanogramos por mililitro— y la saliva está cargada de proteínas y otras sustancias que pueden ocultar o distorsionar la señal. Pruebas antiguas en sangre y orina o bien carecen de precisión o requieren pasos de preparación complejos. Incluso técnicas de laboratorio avanzadas pueden tener dificultades porque las dos hormonas se parecen y se comportan de forma tan similar que se solapan fácilmente durante el análisis, difuminando la relación crítica entre ellas.

Un spray suave que potencia la detección

Los investigadores afrontaron este problema combinando un potente aparato de medida, cromatografía líquida acoplada a espectrometría de masas en tándem, con un ingenioso paso de preparación de muestra llamado microextracción en fase líquida por formación de finas gotas asistida por spray. En términos sencillos, primero crean una saliva artificial que imita de cerca la saliva real y, a continuación, añaden una pequeña cantidad de solvente orgánico usando un pulverizador tipo nasal. Este pulverizador convierte el solvente en una niebla de diminutas gotas que se mezclan brevemente con la saliva, trasladando las hormonas a una capa líquida separada. Tras una corta centrifugación y una evaporación suave, las hormonas concentradas se redisuelven en un volumen mínimo e inyectan en el instrumento de medida.

Ajustes finos para claridad y sensibilidad

Para que este procedimiento fuera realmente fiable, el equipo ajustó sistemáticamente muchos detalles: qué solvente pulverizar, cuánto volumen de muestra usar, cuántos pulsos de spray aplicar, cuánto tiempo mezclar y cuánto solvente emplear en el paso final de redisolución. También optimizaron los ajustes del instrumento para que la hidrocortisona y la cortisona aparezcan como picos limpios y separados con señales estables. En las mejores condiciones, el nuevo método pudo detectar niveles muy por debajo de los que se encuentran habitualmente en saliva: hasta 64 veces más sensible para la cortisona y 11 veces para la hidrocortisona en comparación con la medida directa sin el paso de spray. Pruebas en dos recetas diferentes de saliva artificial mostraron que, cuando la calibración se ajusta correctamente al fondo salival, las cantidades medidas concordaban estrechamente con las cantidades realmente añadidas.

Qué significa esto para las pruebas de estrés futuras

En términos cotidianos, este estudio ofrece un método de laboratorio muy afinado que puede “escuchar” las señales apenas perceptibles de las hormonas del estrés en fluidos similares a la saliva. Aunque el trabajo actual empleó saliva artificial para evitar cuestiones éticas y prácticas, los resultados sugieren que el enfoque podría adaptarse a la saliva humana real en futuros estudios clínicos. Si se confirma, este método podría ayudar a los médicos a monitorizar trastornos relacionados con el estrés, personalizar terapias de reemplazo hormonal y estudiar cómo nuevos fármacos afectan el equilibrio hormonal —todo a partir de una simple muestra de saliva.

Cita: Gürsoy, S., Bodur, S., Atakol, A. et al. Determination of hydrocortisone and cortisone in artificial saliva by spray assisted fine droplet formation liquid phase microextraction coupled to LC–MS/MS. Sci Rep 16, 7064 (2026). https://doi.org/10.1038/s41598-026-38457-z

Palabras clave: cortisol salival, cortisona, hormonas del estrés, microextracción, espectrometría de masas