طريقة RP-HPLC خضراء تعتمد على DOE للتحديد المتزامن للأزيلستين واللوسارتان في عينات بلازما بشرية مضافة

لماذا تهمّ هذه الدراسة

يعيش الكثير من الناس مع حالات متعلّقة بالقلب، مثل ارتفاع ضغط الدم، ومع أمراض تحسّسية في آن واحد. دواءان يستخدمان كثيراً في هذه الحالات هما الأزليستين، مضاد للحساسية، واللوسارتان، دواء لخفض ضغط الدم يحمي أيضاً الأوعية الدموية. يحتاج الأطباء والباحثون إلى طرق موثوقة لقياس كمية هذه الأدوية في دم المريض، سواء لضبط العلاج أو لدراسة علاجات مركّبة جديدة. تعرض هذه الدراسة اختباراً مخبرياً حساساً يمكنه قياس الدواءين معاً في بلازما الدم البشرية، مع تقليل النفايات الكيميائية وجعل العملية أكثر صداقة للبيئة.

دواءان ومشكلة صحية مشتركة

الالتهاب المزمن منخفض الدرجة وتلف البطانة الداخلية للأوعية الدموية يقفان وراء العديد من الأمراض الحديثة، بما في ذلك السكري وارتفاع ضغط الدم والأمراض التحسسية. يساهم الهيستامين الذي تفرزه الخلايا المناعية في أعراض الحساسية وقد يعزّز أيضاً أمراض الشرايين. يساعد الأزليستين عبر تثبيت هذه الخلايا المناعية وصد تأثيرات الهيستامين، مما يخفف أعراض الحساسية. اللوسارتان، الذي طُور في الأصل لخفض ضغط الدم، يقلل الإجهاد على القلب والأوعية الدموية ويخفف أيضاً الالتهاب ونشاط الصفائح الدموية. تشير دراسات على الحيوانات إلى أن استخدام الدواءين معاً قد يحسّن وظيفة الأوعية الدموية ومستويات السكر في الدم أكثر من كل دواء بمفرده، مما يجعل الزوج خياراً واعداً للعلاجات المركبة المستقبلية.

تحدّي تتبّع الأدوية في الدم

لاختبار هذا المزيج الدوائي بأمان واستخدامه في البشر، يجب على العلماء قياس كميات صغيرة جداً من الأزليستين واللوسارتان في عينات الدم. تركز الطرق التحليلية التقليدية غالباً على دواء واحد، وتتطلّب العديد من محاولات التجريب والتعديل، وتستخدم أحجاماً كبيرة من المذيبات العضوية المكلفة والضارة بالبيئة. سعى المؤلفون لتصميم اختبار واحد مبسّط يمكنه فصل وقياس كلا الدواءين في بلازما الإنسان بدقة وموثوقية عاليتين، وبطريقة توفّر الوقت والمذيب والطاقة.

نهج أذكى لبناء الاختبار

بدلاً من ضبط الطريقة بالحدس فقط، استخدم الباحثون استراتيجية منظمة «تصميم التجارب» (DOE). استكشفوا أولاً عوامل تجريبية عديدة محتملة، مثل نوع المذيبات ومعدل التدفق والحرارة وحموضة المحلول، ثم حدّدوا ثلاثة عوامل كان لها التأثير الأكبر على الأداء: نسبة الميثانول، نسبة الأسيتونتريل وحموضة العازلة المائية. طبقوا بعد ذلك تصميماً إحصائياً يُدعى التصميم المجموعي المركزي لاختبار تركيبات مختلفة من هذه العوامل في 20 تجربة مختارة بعناية فقط. من خلال تحليل كيف يؤثر كل إعداد على شكل القمم وفصل الدواءين وإشارة القياس والوقت الإجمالي للتشغيل، بنوا نماذج رياضية أشارت إلى الشروط المثلى.

كيف تعمل الطريقة الخضراء عملياً

وفق الشروط النهائية، يحمل خليط من الميثانول وكمية صغيرة من الأسيتونتريل وعازلة فوسفاتية خفيفة الحموضة الأدوية عبر عمود كروماتوغرافي، حيث تنفصل زمنياً قبل الوصول إلى كاشف فلوري حساس. يوفّر هذا الترتيب إشارات حادة ومفصولة جيداً لكل من الأزليستين واللوسارتان في حوالي 14 دقيقة. تستطيع الطريقة قياس تراكيز منخفضة جداً من كل دواء في بلازما الإنسان بشكل موثوق، ما يجعلها مناسبة لمراقبة العلاج الدوائي. أظهرت عملية التحقق خطية ممتازة ودقة وتكرارية ومتانة، مما يعني أن التغيرات الطفيفة اليومية لا تؤثر على الأداء. والأهم من ذلك أن تصميم التجارب الكفء خفّض عدد التجارب وحجم المذيب اللازم لتطوير وتشغيل الطريقة.

قياس الأداء مع مراعاة البيئة

لحكم مدى صداقة منهجهم للبيئة، طبق المؤلفون أداتين حديثتين للتقييم، Complex MoGAPI وAGREE، اللتان تقوّمان الأساليب التحليلية بعوامل مثل سمية المذيبات وتوليد النفايات واستهلاك الطاقة والاستدامة العامة. سجّلت الطريقة الجديدة نقاطاً أفضل من مقاربات الكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء التقليدية التي لا تستخدم تصميم تجارب منظم، مما يعكس انخفاض استخدام المذيبات وقلة تجارب التحسين. أشارت أدوات إضافية تقيم التكلفة والعملية وسهولة الاستخدام اليومي إلى أن الطريقة ليست خضراء فحسب، بل بسيطة وميسورة بما يكفي للاستخدام الروتيني في المختبرات.

ماذا يعني هذا للمرضى والمختبرات

بعبارات بسيطة، تقدّم الدراسة اختباراً مخبرياً يمكنه تتبّع دوائين مهمّين مرتبطين بالقلب والحساسية في دم الإنسان بدقة مع استهلاك أقل للوقت والمذيبات والموارد. يمكن أن تدعم مثل هذه الطريقة الدراسات السريرية لمجموعات الأزليستين واللوسارتان، وتساعد الأطباء على مراقبة العلاج لدى المرضى المنومين، وتشجّع اعتماد ممارسات تحليلية أكثر خضرة على نطاق أوسع. بدمج التخطيط التجريبي الذكي مع الوعي البيئي، توضح الدراسة كيف يمكن للمختبرات الحصول على بيانات أفضل بينما تقلّل أثرها البيئي.

الاستشهاد: Roshdy, A., Belal, F. & Marie, A.A. Green DOE based RP-HPLC method for the simultaneous determination of Azelastine and Losartan in spiked human plasma samples. Sci Rep 16, 8263 (2026). https://doi.org/10.1038/s41598-026-39426-2

الكلمات المفتاحية: مراقبة العلاج الدوائي, أزيلستين واللوسارتان, الكيمياء التحليلية الخضراء, تحليل بلازما الدم, الكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء